Материалы и оборудование
Проросшие семена овса с колеоптилиями не менее 1,5 см длиной [замочите 100 зерен овса в воде и оставьте их на ночь; замоченные семена положите на мокрую фильтровальную бумагу в чашке Петри, накройте чашку алюминиевой фольгой и поместите в темное место (семена проращивают пять дней в термостате при 20°С); для того чтобы получить 60 колеоптилей, нужных для каждого опыта, следует замачивать по меньшей мере 100 зерен, так как часть их может не прорасти]
6 пробирок вместе со штативом
6 чашек Петри с крышками
5 градуированных пипеток на 5 мл
Мерный цилиндр на 25 мл или градуированная пипетка на 10 мл
Резак для колеоптилей (рис. 15.10)
Кисточка
Исходный раствор ИУК (1 г/л). (ИУК с трудом растворяется в воде, поэтому ее сначала растворяют в этаноле: растворите 1 г ИУК в 2 мл этанола и разбавьте раствор дистиллированной водой до 900 мл; нагрейте раствор до 80°С и подержите его 5 мин при этой температуре; доведите раствор дистиллированной водой до 1 л. Количество раствора готовится в соответствии с тем, сколько его нужно для опыта)
2%-ный раствор сахарозы
Дистиллированная вода
Методика
1. Возьмите 6 пробирок и 6 чашек Петри и подпишите их буквами от А до Е.
2. В каждую пробирку внесите 18 мл 2%-ного раствора сахарозы.
3. С помощью чистой пипетки на 5 мл добавьте 2 мл исходного раствора ИУК в пробирку А и тщательно перемешайте оба раствора.
4. Взяв новую пипетку, перенесите 2 мл раствора из пробирки А в пробирку Б и тщательно перемешайте содержимое пробирки Б.
5. Используя каждый раз новую пипетку, перенесите 2 мл из пробирки Б в пробирку В, перемешайте; затем — 2 мл из пробирки В в пробирку Г, перемешайте; затем-2 мл из пробирки Г в пробирку Д.
6. В пробирку Е добавьте 2 мл дистиллированной воды.
7. Перенесите растворы из пробирок А-Е в чашки Петри А-Е.
8. Возьмите 60 проростков овса и отрежьте по 10 мм колеоптилей, отступив от верхушки на 2 мм. Возьмите резак с двумя лезвиями, установленными точно на расстоянии 10 мм друг от друга; для установки используйте шайбы или другие прокладки; резак должен быть скреплен винтом и двумя гайками (см. рис. 15.10). Если выровнять кончики колеоптилей, можно сразу отрезать по нескольку препаратов.