Принцип метода основан на том, что салициловая кислота вызывает денатурацию белка (помутнение). Интенсивность помутнения пропорциональна концентрации белка.
Принцип методаСпециальное оборудование: фотоэлектроколориметр.
Специальное оборудованиеХод исследования
Ход исследованияВ связи с высоким содержанием белка в транссудатах и экссудатах их перед исследованием разводят 0,9%-ным раствором натрия хлорида. Степень разведения ориентировочно устанавливают по реакции с сульфосалициловой кислотой. После этого готовят основное разведение выпотных жидкостей 1 : 100, для чего к 0,1 мл экссудата или транссудата добавляют 9,9 мл 0,9%– ного раствора натрия хлорида. При необходимости (большое содержание белка) степень разведения можно увеличить. В пробирку вносят 1,25 мл разведенной жидкости и 3,75 мл 3%-ного раствора сульфосалициловой кислоты, содержимое перемешивают. Через 5 мин фотометрируют при длине волны 590–650 нм (оранжевый или красный светофильтр) в кювете с длиной оптического пути 0,5 см против контрольной пробы, в которую вместо сульфосалициловой кислоты вносится 3,75 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида.
Расчет производят по калибровочному графику с учетом разведения пробы (табл. 50). Для построения графика из стандартного раствора альбумина готовят разведения и обрабатывают их как опытные пробы.
Расчет
Построение калибровочного графика
Построение калибровочного графика
Примечание
ПримечаниеПрямолинейная зависимость калибровочного графика сохраняется до концентрации белка 1000 мг/мл. В экссудатах содержится от 30 до 80 г/л белка, тогда как в транссудатах – 5–25 г/л.
Проба Ривальта была предложена также для дифференцирования транссудатов и экссудатов.
Проба Ривальта