Для количественной оценки мегакариоцитов используют следующие методы:
1) подсчет в камере;
2) подсчет в мазках: по полям зрения, по отношению к количеству всех ядерных клеток костного мозга.
Все эти методы не являются достаточно точными. Наиболее точное количественное представление дает подсчет их в срезах костного мозга, полученного при трепанобиопсии.
Подсчет в счетной камере. При разведении пунктата костного мозга уксусной кислотой (1 : 20) происходит гемолиз эритроцитов, позволяющий производить подсчет мегакариоцитов в счетной камере. Разведение пунктата костного мозга и методика подсчета аналогичны подсчету лейкоцитов в крови.
Подсчет в счетной камереПодсчет производят на всей поверхности сетки, затем число сосчитанных мегакариоцитов умножают на разведение (20) и делят на объем камеры (3,2).
Мегакариоциты в камере видны в виде крупных клеток с полиморфным гиперсегментированным ядром и широкой зоной цитоплазмы. Недостаточная точность метода обусловлена тем, что в камере не распознаются мелкие формы (мегакариобласты, голые ядра и др.), которые не попадают в счет. Преимущество метода – равномерное распределение клеток в счетной камере. У здорового человека в 1 мкл пунктата костного мозга при подсчете в счетной камере обнаружено (по данным разных авторов) 63 ± 10 и 83 ± 13,86 мегакариоцитов. У здоровых детей в возрасте от 5 месяцев до 3 лет общее количество мегакариоцитов составляет около 116 ± 10,8 в 1 мкл пунктата.
Подсчет в мазках по полям зрения. В мазках пунктата костного мозга подсчитывают мегакариоциты при малом увеличении микроскопа с выведением средних цифр.
Подсчет в мазках по полям зренияНеточность метода обусловлена тем, что в мазках мегакариоциты располагаются неравномерно, сосредоточиваясь больше по краям препарата и в конце мазка. У здорового человека в мазках пунктата костного мозга в 250 полях зрения содержится 5–12 мегакариоцитов.
Подсчет в мазках по отношению к числу всех ядерных клеток. В мазках пунктата костного мозга при выведении миелограммы (подсчет не менее 500 клеток) отмечается процент мегакариоцитов. Недостаток метода тот же, что и при подсчете в мазках по полям зрения.
Подсчет в мазках по отношению к числу всех ядерных клетокВ среднем у здорового человека в пунктате костного мозга количество мегакариоцитов составляет 0,1–0,2%. Данные разных авторов свидетельствуют о широких колебаниях процента мегакариоцитов в мазках пунктата костного мозга – от 0 до 1,2%, в среднем он составляет 0,4 × 0,18%.
Резкое увеличение количества мегакариоцитов в костном мозге наблюдается при миелопролиферативном синдроме, особенно при полицитемии, а также при идиопатической тромбоцитопенической пурпуре (болезни Верльгофа), при циррозе печени с явлениями гиперспленизма.