При исследовании кала на простейшие используют 2 метода:
1) метод нативного мазка и мазка с раствором Люголя;
2) метод фиксированных окрашенных препаратов.
Первый метод является основным и применяется в большинстве клинико-диагностических лабораторий. Второй (окраска железным гематоксилином по Гейденгайну) – сложен, трудоемок, применяется в редких случаях, когда невозможно обойтись исследованием только нативных препаратов.
В кишечнике человека находится большое количество микроорганизмов. Кал на 40–50% состоит из погибших бактерий. При усилении процессов брожения, особенно при бродильной диспепсии, в кале можно обнаружить йодофильную флору. Она располагается кучками и скоплениями. Морфология ее различна: палочки, кокки, дрожжевые клетки и др. Все они обладают свойством окрашиваться раствором Люголя в черный или темно-синий цвет. В норме йодофильная флора в кале отсутствует.
Приготовление препаратов
Приготовление препаратовДля приготовления препаратов предварительно растирают комочек кала в небольшом количестве дистиллированной воды до консистенции жидкой кашицы. Затем по капле эмульсию наносят на 4–5 предметных стекол. На 1-м стекле готовят нативный препарат. Содержимое препарата накрывают покровным стеклом. На втором стекле готовят препарат с раствором Люголя. Каловую эмульсию хорошо перемешивают с раствором Люголя (1 г йода, 2 г йодида калия, 50 мл дистиллированной воды). На 3-м стекле готовят препарат с метиленовым синим для обнаружения жирных кислот, мыл и нейтрального жира. На 4-м стекле готовят препарат с глицерином. 5-й препарат готовят с краской Судана 3.
Нативные препараты, окрашенные и неокрашенные, рассматривают под малым увеличением микроскопа. Для более детального изучения используют большое увеличение. Существуют методы накопления цист. Из них наиболее распространен метод флотации с помощью 33%-ного раствора сульфата цинка.
Эфирно-формалиновый метод обогащения фекалий на цисты
Эфирно-формалиновый метод обогащения фекалий на цистыЦентрифугируют водную суспензию кала (1 : 10). К осадку добавляют 10 мл 10%-ного раствора формалина. Через 5 мин после перемешивания приливают 3 мл эфира. Пробирку закрывают пробкой, интенсивно встряхивают. Центрифугируют в течение 2 мин при 1500 об./мин. Из осадка делают препараты (нативный и с раствором Люголя).
Морфология простейших
Морфология простейших
Клетки простейших покрыты плотной эластической мембраной – пелликулой, образуемой периферическим слоем цитоплазмы. Некоторые из них снабжены опорными фибриллами и минеральным скелетом, отсутствующими у бактерий. Цитоплазма простейших содержит компактное ядро или несколько ядер, окруженных мембраной, ядерный сок (кариолимфу), хромосомы и ядрышки, а также структуры, свойственные клеткам многоклеточных животных организмов: эндоплазматический ретикулум, рибосомы, митохондрии, аппарат Гольджи, лизосомы, различные типы вакуолей и др.