В пробирку наливают 4–5 мл мочи и осторожно, по стенкам пробирки, наслаивают раствор йода. Появление на границе между жидкостями зеленого кольца говорит о наличии билирубина.

Проба Готфрида

Принцип метода

Билирубина глюкуронид (холебилирубин) при соединении с диазотированной сульфаниловой кислотой (диазобензосульфоновая кислота) дает розовую окраску за счет образования билирубина.

Необходимые реактивы

1. 10%-ный раствор хлорида бария.

2. Диазореактив: диазораствор I – 5 г сульфаниловой кислоты растворяют в небольшом количестве воды, прибавляют 15 мл концентрированной HCl и доливают до 1000 мл дистиллированной водой.

3. Диазораствор II – 0,5%-ный раствор нитрата натрия. Непосредственно перед определением смешивают 10 мл диазораствора I и 0,25 мл диазораствора II.

4. Спирт этиловый 96%-ный.

5. 6%-ный раствор двузамещенного фосфата натрия.

Ход исследования

К 10 мл мочи, подкисленной несколькими каплями уксусной кислоты, прибавляют 5 мл 10%-ного раствора хлорида бария, перемешивают, фильтруют через бумажный фильтр. Фильтр раскладывают на дне чашки Петри и на осадок, содержащий билирубин, капают 1–2 капли свежеприготовленной диазосмеси, 4 капли спирта и 1 каплю двузамещенного фосфата натрия. При положительной пробе получается красно-фиолетовая окраска.

Этот принцип лег в основу экспресс-тестов для определения билирубина, выпускаемых зарубежными фирмами «Ames» (Англия), «Boehringer» (Германия) и др.

Определение содержания желчных кислот

Определение содержания желчных кислот