В счетной камере с сухой системой (окуляр 15° или 10°, объектив – 40°) можно дифференцировать почти все элементы. Реактив окрашивает все ядра клеток в красновато-фиолетовый цвет, цитоплазма остается бесцветной. При этом обращают внимание на величину клеток, форму и расположение ядра, ядерно-цитоплазменное соотношение, наличие включений в цитоплазме. Этот метод используется наиболее часто.
Дифференциация клеточных элементов в окрашенных препаратах
Дифференциация клеточных элементов в окрашенных препаратах Дифференциация клеточных элементов в окрашенных препаратахОкраска по Розиной. Жидкость центрифугируют в течение 7–10 мин. Надосадок сливают легким покачиванием его по поверхности стекла, через 1–2 мин жидкость сливают. При небольшом лейкоцитозе (менее 50 мкл) осадок распределяют на участке 1 см2; при лейкоцитозе, превышающем 100 в 3 мкл, – на участке 1,5–2 см2; при лейкоцитозе 500 в 3 мкл – на участке 2–3 см2. При очень большом лейкоцитозе осадок распределяют по всему предметному стеклу. Мазок высушивают в сушильном шкафу. Затем фиксируют метанолом в течение 1–2 мин и окрашивают по Романовскому: тонкий препарат с небольшим цитозом – 6–7 мин, с большим цитозом – 10–12 мин. Затем краску сливают, мазок промывают дистиллированной водой и высушивают. Если ядра имеют бледно-голубой цвет, мазок докрашивают еще в течение 1–2 мин.
Окраска по Розиной.Окраска по Везновой. Осадок выливают на стекло, слегка покачивая его, жидкость равномерно распределяют по поверхности. Мазок высушивают при комнатной температуре в течение суток, фиксируют метиловым спиртом в течение 5 мин, покрывают специальными красителями, окрашивают в течение 1 ч. Если клетки бледны, докрашивают неразведенной краской под контролем микроскопии в течение 2–10 мин. Чем больше форменных элементов в ликворе, особенно при наличии крови, тем больше надо дополнительно окрашивать.
Окраска по Везновой.Окраска по Алексееву. На высохший, но не фиксированный препарат наносят 8–10 капель красителя по Романовскому. Той же пипеткой осторожно распределяют краску на весь препарат и оставляют на 30 с. Затем добавляют на препарат 12–20 капель дистиллированной воды, нагретой до 40–60 °С. Соотношение капель краски и воды должно быть 1 : 2. Помешивают краску с водой и оставляют на 3 мин. Смывают краску струей дистиллированной воды, сушат препарат фильтровальной бумагой и микроскопируют. Метод применяется при срочном цитологическом исследовании.
Окраска по Алексееву.