Про Бартоло достоверно известно, что он учился у Чино да Пистойа. В Перудже под его руководством Бартоло изучал право. Юрист Бартоло был обязан юристу Чино своим практическим подходом к изучению текстов по римскому законодательству. Чино одним из первых стал «приспосабливать» римское право к местным законам. После обучения в Перудже Бартоло, так же как и Петрарка за несколько лет до него, отправился в столицу юристов Болонью. На этом сходство биографий закончилось. Известно, что Петрарка бросил юриспруденцию и удрал из Болоньи при первой же возможности. Бартоло после учёбы в университете приступил к написанию диссертации. Защита состоялась 10 ноября 1334 года. Бартоло получил кольцо, книгу и головной убор юриста (biretta), в котором он изображён на портрете. После защиты диссертации Бартоло провёл некоторое время в одиночестве в монастыре Святого Виктора вблизи Пизы, где скрывался от чумы.

В 1338 году папа Бенедикт XII, третий авиньонский понтифик, по каким-то причинам наложил интердикт на Болонью, и большое число студентов перебралось в Пизу. Некоторое время Бартоло преподавал в Пизе. В 1343 году он переселился в Перуджу, где прожил всю оставшуюся жизнь. Основные работы Бартоло связаны с деятельностью в Перудже.

Бартоло работал и с каноническим, и гражданским правом, потому что в мирских вопросах каноническое право было основополагающим на территории земель, принадлежащих церкви. В вопросах, относящихся к католической церкви, каноническое право применялось везде.

В 1348 году нормальная жизнь в Перудже прервалась из-за очередной вспышки чумы. Власти приостановили лекции в университете, и все, кто мог, покинули город. Чума началась в апреле, а к августу в городе и окрестностях насчитывали около 100000 жертв. Бартоло пишет, что власти закрыли суды и упростили формальности с оформлением завещаний. К осени чума ослабла, и город вернулся к нормальной жизни.

В 1348 году Бартоло получил гражданство города Перуджа. В городе существовал закон, сейчас выглядящий странно – жителям Перуджи запрещалось преподавать в собственном университете, то есть получать зарплату от городских властей. Городские власти Перуджи чрезвычайно ценили Бартоло и сделали для него исключение. Бартоло продолжил преподавание после получения гражданства и тем самым «умножил славу Перуджи».

Бартоло всячески защищал гражданское право. Он писал, что как медицина без философии vidua, так и каноническое право без гражданского права vidua et imperfecta scientia. (Vidua – незамужняя женщина, то есть женщина ещё не исполнившая своего предназначения. Imperfecta scientia – несовершенная наука.) Бартоло сравнивал гражданское право с «библейским камнем, от которого отказались строители, но которое впоследствии стало краеугольным камнем». Он упрекал городские власти Перуджи, за то, что юристам было запрещено участвовать в городском управлении, в то время как во времена их предков юристы были самыми важными членами правительства. Он сожалел, что в римской курии и в церквях священникам запретили изучать гражданское право; без него, по убеждению Бартоло, не может быть справедливости в церковных судах.